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兔高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa试剂盒
兔高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa试剂盒
起批量( 价格
≥1 ¥1680元/盒
  • 供货能力:现货
  • 最低订购量:1盒
  • 可销售总数量:10000盒
  • 建议零销价:1600元/盒
  • 发布日期: 2017-04-30
  • 更新日期: 2018-09-28
产品详细说明
品牌: 国产 产地: 上海
样本: 标记物:
应用: 检测方法: ELISA
检测限: 数量: 1000
货号:

  产品名称:兔高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa试剂盒

联系电话:18910821817    

产品规格:48T/96T

检测方法: ELISA酶联免疫法

  书:随货发送,也可直接联系在线销售索取

测试种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、鸭elisa试剂盒等种属

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

试剂盒保存及有效期:2-8,避光保存:6个月。

产品产地:进口/国产

产品库存:现货

品牌:自主研发/进口原装

产品价格:价格优惠,欢迎来电洽谈!

试剂盒使用范围:仅供科研检测,不得用于临床。

产品价格:价格优惠,欢迎来电洽谈!

兔高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa试剂盒试剂盒组成


          

96孔配置

12×8

48孔配置

12×4

  

 1

标准品(40ng/ml)

0.5ml

0.5ml

稀释即用型

 2 

酶标包被板

1

1

已包被即用型

 3

标准品稀释液

3ml

3ml

即用型

 4

链霉亲和素-HRP

6ml

3ml

即用型

 5

30x倍浓缩洗涤液

20ml

20ml

蒸馏水稀释

 6

生物素标记的抗Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1,2(Rock-1,2) 抗体

2ml

2ml

即用型

 7

显色剂A

6ml

3ml

即用型

 8

显色剂B

6ml

3ml

即用型

 9

终止液

6ml

3ml

即用型

10

说明书

1

1

即用型

11

封板膜

2

2

不可反复使用

12

密封袋

1

1

即用型

需要而未提供的试剂和器材

1.    酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm630nm校正波长滤光片

2。    洗板机(可调注液量,保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。

3。    超净工作台,生物安全柜,通风柜。

4.    高精度单道加液器(量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5.    高精度多道加液器(8道或12道,量程为50-300μl)。

6。    37恒温箱。

7.    低温离心机。

8.    电冰箱(4,-20,-86.

9。  漩涡混合仪,低频振荡器等

注意事项

1   2-8取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2   严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

3   为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

4   不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5   底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

6。   所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意安全。

7.  各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间*控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

8.  每次试验测定的同时做标准曲线,。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*乘以总稀释倍数(×n)。

9.  配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要,*使用微量振荡器(使用*频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。

10.  实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。

11.  手工洗板应注意:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0。35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

结果判断

1.  每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。(若不减零孔值,标准曲线的零孔应相交于Y轴)

2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。

3.手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。推荐使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。

4.若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。

 

总结

 

准备试剂,样品和标准品

        

 

加入准备好的样品和标准品,生物素标记二抗和酶标试剂,37反应60分钟。




 

 洗板5次,加入显色液AB,37显色10分钟




  加入TMB终止液




 

10分钟内酶标仪测OD




  计算待测样本因子含量

试剂盒性能

1。 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9200。

2。 灵敏度:最小可检测浓度达,0.078ng/ml。

3。 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%

5 。 回收率:70-110%.

6. 贮藏:2-8,避光防潮保存。

7. 有效期:6个月

8. 检测范围:38ng/ml -0.312ng/ml

 

 

关于ELISA试剂盒

ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。

ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。

Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。

免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。

HBsAg试剂特点(检测模式:临床抗体夹心法):包被抗体为山羊多抗。多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,提高检测的特异性(99.98%)提高检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEIHBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/mlay标准品灵敏度为0。025ng/ml

ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。

LISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。

然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。

特点:一、高效、灵敏、特异的抗体;
  二、稳定的重复性和可靠性;
  三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
  四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
  五、节省实验经费。

elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为99%。

安全性

1 避免直接接触终止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

5 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

6 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。

8 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

11 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

12 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。




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